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歷 年 稿 件 內 容
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類別:
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姓名:
呂汶紋
投稿種類:
壁報
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中文投稿標題:
以雙報導細胞試驗鑑定單純疱疹病毒的血清型
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中文作者姓名列:
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中文服務單位:
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英文投稿標題:
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英文作者姓名列:
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英文服務單位:
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投稿摘要:
我們建構可即時檢測herpes simplex virus(單純皰疹病毒,HSV)感染的雙報導細胞分析(A dual reporter cell assay,DRCA)系統。建立方式為將細胞穩定轉染一含有兩個報導基因的質體,分別為分泌性鹼性磷酸酶(secreted alkaline phosphatease,SEAP)及增強型綠色螢光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP),並且由單純皰疹病毒的早期基因啟動子所控制誘發。所選用的兩個細胞株是幼倉鼠腎(baby hamster kidney cell,BHK)纖維細胞及中華倉鼠卵巢(Chinese hamster ovary cell,CHO)細胞,BHK細胞無論是血清型第一型的HSV(HSV-1)或血清型第二型HSV(HSV-2)都可以被感染,而CHO細胞則只被HSV-2感染。基於上述特性,我們可利用DRCA,不必破壞細胞即可於感染後8小時,以螢光顯微鏡即時觀查EGFP陽性細胞的有無,判斷是否受到HSV-1或HSV-2的感染。 而利用BHK細胞所建構的DRCA對感染HSV的敏感性非常高,即使感染1溶斑形成單位(plaque forming unit,PFU)的低病毒量時,於感染後24-48小時即可用化學冷光試驗檢測SEAP的活性來得知。此外,我們也建立了HSV病毒量與SEAP活性的標準曲線圖。總之,這套新穎又實用的DRCA可以即時區分HSV的血清型,也具有發展為檢測方式簡單、快速、且適合大量篩選的平台,未來亦可能發展成測定藥物敏感性的測定方式。
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關鍵字1 :
單純皰疹病毒
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關鍵字2 :
雙報導細胞分析
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關鍵字3 :
增強型綠色螢光蛋白
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關鍵字4 :
分泌性鹼性磷酸酶
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關鍵字5 :
血清分型
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第一作者:
呂汶紋
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無意見
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